[摘要]目的：观察大鼠正畸牙齿移动过程中上皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase ，eNOS）在牙周组织内的表达分布，从而探讨一氧化氮（nitric oxcide，NO）及eNOS在正畸牙齿移动中的意义。方法：建立大鼠正畸实验动物模型，取其受力牙及牙周组织做免疫组化切片。结果：eNOS随牙齿移动时间的不同其表达分布发生变化，在加力第一天牵张侧的eNOS表达明显增强。结论：NO及eNOS在正畸牙齿移动中发挥作用，eNOS在牙齿移动的早期起了重要的介导作用。
[关键词]一氧化氮合酶；一氧化氮；免疫组化；牙齿移动
[中图分类号]R783[文献标识码]A[文章编号]1008-6455(2008)03-03
The early effection of endothelial nitric oxide synthase in rat"s periodontal tissues during orthodontic tooth movement
PEI Xiu-jie1,LIN Gui-shu2,QI Yan-yun1
(1.Department of Orthodontics,The First Hospital in the City of Qinhuangdao,Qinhuangdao 066000,Hebei,China;2.Department of Orthodontics,The Third Affiliated Hospital of Hebei Medical University)
Abstract:Objective To observe the distribution and the changes of endothelial nitric oxide synthase(eNOS) in periodontal tissues.To evaluate the putative role of nitric oxide(NO) and endothelial nitric oxide synthase(eNOS) in orthodontic tooth movement. MethodsApplied force on the left first maxillary molars in rats and examined the decalcified alveolodental connected tissues in different stages of tooth movement with immunohistochemical staining technique (SP method).ResultseNOS exists in normal periodontal tissues.The expression of eNOS changesduring orthodontic tooth movement.ConclusionNO and eNOS plays animportant role in remodeling of periodontal tissues during orthodontic tooth movement. eNOSreacts actively earlier.
Key words:nitric oxide synthase;nitric oxide;immunohistochemistry;tooth movement
有关一氧化氮(nitric oxide,NO)及一氧化氮合酶( nitric oxide synthase,NOS)在口腔医学中作用的研究自1993年Bodis首次在唾液中检测到一氧化氮开始便如火如荼。而关于其在口腔正畸学中作用的研究目前在国内鲜有报道。本实验通过建立大鼠的正畸实验动物模型，对其受力牙及牙周组织进行免疫组化染色，观察上皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）在牙周组织内的表达分布，从而探讨NO及eNOS在正畸牙齿移动中的作用及意义。
1材料和方法
1.1实验材料：雌性SD大鼠（sprague -dawley rats）25只（由河北医科大学实验动物中心提供）14周龄，体重（240+20）g，标准饲料，自由饮水，分笼，适应性喂养一周后实验。主要试剂：北京中山生物有限公司生产的eNOS免疫组化试剂盒。
1.2方法
1.2.1实验分组：将实验动物随机分为加力0、1、3、7、14天组,每组5只。
1.2.2正畸实验：将实验动物按照50mg/Kg行戊巴比妥那麻醉，然后在大鼠的左侧上颌第一磨牙及左侧上颌切牙的牙颈部用细金刚砂车针打磨出一“C”形固位沟，将两牙间用结扎丝和镍钛拉簧连接，牵引力为60g。
1.2.3标本制作：将大鼠按组分别行4％多聚甲醛心包灌注致死，然后取其受力侧的第一磨牙及其周围牙槽骨组织放入4％多聚甲醛中4℃固定24h，10％EDTA常规脱钙、包埋、制作石蜡切片，切片厚度为3μm，然后行HE及免疫组化染色。
2结果
加力0D偶见破骨细胞及个别血管上皮细胞有少量eNOS表达；加力1D牵张侧血管内皮细胞、破骨细胞、部分成纤维细胞eNOS表达增多；加力3D破骨细胞、成纤维细胞、成骨细胞、血管内皮细胞均呈强阳性高表达；加力7D各种细胞表达强度均有所减弱；加力14D破骨细胞数量减少，表达进一步减弱，少量间质细胞、成骨细胞有弱表达。采用样本间两两比较秩和检验统计结果显示各组阳性表达面积不同或不完全相同，加力0D组与加力1D组，加力0D组与加力3D组的表达面积存在差异，结果有统计学意义（P 本次实验结果显示在加力的过程中，eNOS在牙周组织中随受力时间的长短而变化，说明NO参与了正畸过程牙周组织的改建。在加力的第1天受力牙的牵张侧，eNOS的活性显著增强，这个结果与Kikuri的实验一致。说明在受力的早期eNOS起了重要的介导作用，而且早期激活的eNOS存在于扩张的血管周围，提示早期的机械牵张力一方面直接作用于牙周膜细胞激活牙周膜细胞内的eNOS，另一方面作用于血管内皮细胞使得血管内皮细胞中eNOS活性增强，这样局部的NO浓度适度的升高使得牙周膜内环境稳定，血管张力平衡得以保持。有实验表明牙周纤维细胞所受牵张力使之发生细胞形变，当细胞形变达到细胞体的2.8％时就会使细胞内Ca2+的浓度发生改变，也许这是机械力作用早期使得原生型NOS被激活的原因。
总之，NO及eNOS在正畸牙齿移动牙周组织改建过程中起了重要的介导作用，研究它的作用机理对于研究加速正畸牙齿移动速度，及抑制牙齿移动中病理性的骨吸收等具有重要的临床实用意义，对其进一步的研究还需要更多的实验。
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[收稿日期]2007-01-23 [修回日期]2007-12-10
编辑/何志斌
注：“本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文。”