[摘要]目的：观察聚丙烯酰胺水凝胶（PAMHG）注射后发生并发症者的外周血淋巴细胞的免疫学变化。方法：应用流式细胞分析技术测定注射PAMHG后发生并发症患者的外周血淋巴细胞各个亚群含量变化并与对照组（健康未注射PAMHG）人群相比较。结果：水凝胶组和对照组外周血B淋巴细胞在各个时间组变化趋势一致，组间差异无显著性。外周血T淋巴细胞亚群百分率水凝胶组均存在1～7项不等的指标异常。水凝胶组T3、T4、T8、NK细胞、Tn亚群含量、Ts亚群含量在各个时间组均低于对照组；水凝胶组Tm和Tc亚群在各个时间组均高于对照组。结论：PAMHG作为软组织充填剂注入人体，引起细胞免疫变化，细胞免疫处于增强状态，对机体的长期免疫效应尚需进一步积累病例并长期观察。
[关键词]聚丙烯酰胺水凝胶；免疫反应；并发症
[中图分类号]R392.12[文献标识码]A[文章编号]1008-6455（2007）10-1340-03
Cellular immunological effects of polyacrylamide hydrogel injected in human body
SUN Bao-dong,LIU Ding-hua,ZHAO Ru,YAN Ying-jun,ZHANG Hai-lin,BAI Ming,QIAO Qun
(Department of Plastic and Aesthetic Surgery,Peking Union Medical College Hospital,Peking Union Medical College,Beijing 100032,China)
Abstract:ObjectiveTo investigate the cellular immunologic changes in patients who have complications after polyacrylamide hydrogel(PAMHG) injected. Methods To compare the patients in the PAMHG injected group and the healthy control group，we examined the proportion of different types of lymphocyte in peripheral vein blood by flow cytometry. ResultsIn PAMHG group, there are 1-7 proportions of lymphocyte type abnormal at different time point respectively. T3, T4, T8, NK, Tn, and Ts cell proportions in PAMHG group were lower than control group at all time points. Tm and Tc cell proportions in PAMHG group were higher than control group at all time points. There were significant difference at 1 or 2 time point. ConclusionPolyacrylamide Hydrogel stimulates the immune system via cellular immunity. The status of immune system is enhanced. The long term immunologic effect of PAMHG needs further observation in more cases.
Key words: polyacrylamide hydrogel; immunity reaction; complication
聚丙烯酰胺水凝胶做为一种软组织填充材料，1997年正式引进中国并应用于临床。聚丙烯酰胺水凝胶因其应用形式简单，容易被患者接受，短短几年内被注射者多达几十万，注射部位遍布全身。但随着并发症的增多以及一些相关问题的凸现，而被禁停使用。国内一些学者对其进行了一些基础研究，关于注射聚丙烯酰胺水凝胶后患者免疫系统发生的变化，目前相关文献较少，因此我们对注射隆乳出现并发症患者进行细胞免疫学研究，探讨患者注射聚丙烯酰胺水凝胶后机体的免疫学变化。
1临床资料
1.1研究对象：在2004年12月～2006年1月，北京协和医院整形外科收治的聚丙烯酰胺水凝胶注射隆乳术后出现感染、破溃、硬结、疼痛等并发症、要求取出的患者中，选取36例为研究对象（水凝胶组），注射时间为4天～7年，年龄为22～46岁；选取健康同龄组24名女性志愿者为对照组，根据水凝胶组年龄进行匹配，按照水凝胶注射进入体内时间分为A、B、C、D四组（见表1），测定患者外周静脉血中淋巴细胞各个亚群组成，了解患者机体免疫功能状态。
1.2 仪器和试剂： 12mm×75mm有盖的Falcon管，混匀振荡器，离心机，加样枪、Tips。仪器：美国Coulter EPICS ELITE ESP型流式细胞仪。三标抗体FITC-CD4/PE-CD8/PerCP-CD3、双标抗体FITC-CD3/PE-CD16+CD56、单标抗体PE-CD19、溶血素（美国Becton-Dickinson公司）；荧光微球 Flow Check（美国Beckman Coulter Immunotech公司）。
1.3 标本采集和处理方法：采集静脉血2ml，EDTA-K2抗凝，室温保存并于4h内检测。应用流式细胞分析技术，测定外周静脉血中淋巴细胞表面CD3、CD4、CD8、CD19、CD16和CD56的表达情况从而计数T、B和NK细胞。
1.4 结果分析：应用SPSS11.5统计软件对数据进行方差分析，以P CD45分子亦称白细胞共同抗原(leukocyte common antigen)，根据CD45亚型的表达与否，可将人的T细胞分为初始T细胞(Tnaive,Tn)(CD45RA+)和记忆T细胞(Tmemmory,Tm) (CD45RA-)。T记忆细胞（Tm）具有自我更新、不断分化成为效应细胞的能力，在细胞免疫中起着重要作用[5-7]。
自然杀伤（NK）细胞在抗肿瘤免疫、克服移植排斥以及抑制自身免疫性疾病的发生中发挥着至关重要的作用[8-9]。
王毓�[10]发现聚丙烯酰胺水凝胶注入兔体内3个月可以引起CD3+T、CD4+T淋巴细胞升高，提示聚丙烯酰胺水凝胶会引起机体免疫反应。冯晓玲[11]研究发现，注射聚丙烯酰胺水凝胶组IgG和C3表达水平较对照组降低， IgM表达水平较对照组升高，认为聚丙烯酰胺水凝胶注入人体，在机体内可引起免疫学变化。
本研究中发现，患者外周血液淋巴细胞中T细胞发生变化，B细胞无变化，提示患者注射聚丙烯酰胺水凝胶后细胞免疫受影响；T淋巴细胞各种成分的比例随注射物在体内时间不同而变化，水凝胶注入体内后成熟T细胞总（T3）百分率出现降低，各个时间组与对照组相比组间差异显著。水凝胶组T4、T抑制/细胞毒（T8）、NK细胞、Tn亚群、Ts亚群、Tactive淋巴细胞在各个时间组均低于对照组，水凝胶组Tm、 Tc亚群在各个时间组含量均高于对照组，分析T3淋巴细胞含量下降的原因可能为T3淋巴细胞持续消耗所致，各组份百分率下降可能是由于其参与免疫反应逐渐消耗所致，从时间序列分析在注入后2～5年变化较明显，T8淋巴细胞的百分比减少可导致机体清除异物的能力降低，NK细胞变化趋势与T4细胞含量变化趋势相符合，表明NK细胞数量变化与T4淋巴细胞亚群对NK细胞调节有关，Tm升高和Tn下降，证实机体细胞免疫处于免疫增强状态。提示植入物进入体内后抗原刺激持续存在，反映机体存在增强免疫反应状态，与其它亚群变化相对应，机体存在T细胞活化增强、细胞免疫水平上调，机体针对异物的免疫反应持续存在。
患者外周血免疫细胞数量、结构、功能和种类等的变化，可反映机体的免疫状态。不同时期、不同患者外周血淋巴细胞亚群百分比的改变并不相同。我们认为，聚丙烯酰胺水凝胶作为异物注入体内可引起机体细胞免疫变化，T3、T4、T8均降低提示免疫细胞的消耗，NK的减少为向局部参与反应所致；TC的增加提示体内细胞免疫为主的反应；Ts的下降反映了对机体免疫的负调控异常，导致机体免疫功能亢进状态；Tm的增高提示体内持续的免疫刺激存在，机体细胞免疫反应持续处于增强反应状态，但是聚丙烯酰胺水凝胶注射后对机体的远期影响尚需加大样本量进一步观察
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[收稿日期]2007-05-11[修回日期]2007-09-29
编辑/张惠娟